摘要
文章介绍了如何测定血浆和红细胞的缓冲能力的测定。根据血液中的缓冲对原理，在血浆中以碳酸氢盐缓冲对为主，在红细胞中以血红蛋白缓冲液为主，进入血液的固定酸（非挥发性酸），则主要由血浆中的缓冲对为主，而非挥发性酸则由红细胞的缓冲液为主。根据以上实验原理，最后实验数据证明：（1）血浆，红细胞都有一定的缓冲能力。（2）红细胞以对挥发性酸缓冲对为主。
关键词
：血浆 红细胞缓冲能力测定
血浆和红细胞缓冲能力的测定
1、
前言
我的实验设计为了让同学们充分了解血液的缓冲能力以及同时学习血液中的各种缓冲液的主要功能。血浆和红细胞的缓冲能力的测定已经证明清楚，但是在本科实验中没有体现，我实验设计就是为了让本科实验更完整。
2
、材料与方法
2.1 实验原理
血浆中的缓冲液：
NaHCO
3/H
2CO
3，Na
2HPO
4/NaH
2PO
4，Na-血浆蛋白/H-血浆蛋白
红细胞中的缓冲系统：
K-Hb/H-Hb K-HbO
2/H-HbO
2 K
2HPO
4/KH
2PO
4 KHCO
3/H
2CO
3
以上缓冲对中，在血浆中以碳酸氢盐缓冲对为主，在红细胞中以血红蛋白缓冲液为主，进入血液的固定酸（非挥发性酸），则主要由血浆中的缓冲对为主，而非挥发性酸则由红细胞的缓冲液为主。根据以上实验原理，我想设计以下实验证明：（1）血浆，红细胞都有一定的缓冲能力。（2）红细胞以对挥发性酸缓冲对为主。
2.2 实验药品及仪器
肝素，离心机，乳酸（3%），离心管，碳酸，PH计，酸式滴定管，烧杯（50ml，8只），铁架台注射器（20ml）碳酸氢钠 盐酸
2.3 实验对象
新鲜哺乳动物血液（可用别组的动物实验完成后采血）
2.4 实验步骤
2.4.1. 去8只50ml的小烧杯，编号1-8。
2.4.2. 取80ml新鲜血液加入肝素（125u/ml）防凝，平均分为4份，一份放入1号杯，一份放入2号杯，另两份放入两根离心管中。
2.4.3. 离心4000rpm,15min.将红细胞和血浆分开（虽然在该步中白细胞也会沉淀下来，但是就缓冲能力方面白细胞针对红细胞而言可以忽略不计，原因：在整体的缓冲能力中红细胞占18%。白细胞占3%。）
2.4.4. 将离心后的血浆部分放入3号，4号杯中，红细胞经生理盐水一次洗涤后放入5号。6号杯中，然后往3-8号杯中加入适量的生理盐水使1-8号杯中的物质总体积相等。
2.4.5. 按下表1加酸，并计录PH值的变化
表1
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1（全血）
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2（全血）
|
3血浆
|
4（血浆）
|
5（血细胞）
|
6（血细胞）
|
7（生理盐水）
|
8（生理盐水）
|
|
乳酸
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V1
|
/
|
V3
|
/
|
V5
|
/
|
V7
|
/
|
|
碳酸
|
/
|
V2
|
/
|
V4
|
/
|
V6
|
/
|
V8
|
3
实验结果
3.1.以下是加入乳酸之前和加入以后的PH值变化的值
表2
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|
全血
|
血浆
|
红细胞
|
生理盐水
|
|
原pＨ值
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7.72
|
7.69
|
7.69
|
6.9
|
|
后pＨ值
|
7.2
|
7.19
|
6.9
|
5.7
|
3.2 下面是往溶液中通入等体积CO
2前和后全血、血浆、血细胞、生理盐水的PH值的变化
表3
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全血
|
血浆
|
血细胞
|
生理盐水
|
|
原pH值
|
7.71
|
7.69
|
7.56
|
6.9
|
|
后pH值
|
7.7
|
7.5
|
7.5
|
6.2
|
4
结论
4.1 从表2的数据可得：
X全血（=
0.06736
） >
X血浆（=
0.06502
）〈
X红细胞（=
0.10273
）〈
X生理盐水（=
0.17391）
从上式可知对固定酸而言血浆的缓冲能力比红细胞强
注：1、
X为每个标本实验前后的pH值的变化值与实验前pH值的商，即每个标本实验前后的pH值变化率（以下
X
’一样）；
2、理论上：
X全血〈
X血浆，而实际所得结果刚好相反，原因可能是仪器和操作产生的误差引起。
4.2
从表3的数据可得：
X
’全血（=
0.0013）〈
X
’红细胞（=
0.0079） <
X
’血浆（=
0.0247） 〈
X
’生理盐水（=
0.1014）
从上式可知对挥发性酸而言红细胞的缓冲能力比血浆强。
4.3
由表2和表3数据对比可得：
｜
X
’红细胞—
X
’血浆｜（0.0168） 〈 ｜
X红细胞—
X血浆｜（0.03771）
注：｜
X红细胞—
X血浆｜代表同一组中红细胞pH值变化率和血浆pH值变化率之差的绝对值。
从上式可知血浆的缓冲能力比红细胞强。原因：虽然对固定酸而言血浆的缓冲能力比红细胞强；对挥发性酸而言红细胞的缓冲能力不血浆强，但是血浆和红细胞对固定酸和挥发性酸都有缓冲能力，从实验数据我们可以看到，由于血浆的缓冲能力比红细胞强才使得｜
X
’红细胞—
X
’血浆｜（0.0168） 〈 ｜
X红细胞—
X血浆｜（0.03771）
的成立。
5
实验的总结
我的实验设计还存在很大的问题，下面是我对我实验的改进：
（1）：我在开始的时候没有考虑到经过离心很多老化的红细胞就会破裂，这样就会造成红细胞量的减少，所以最好是放入4度冰箱中静止，让其自然沉淀。
（2）.对于CO
2来说有很多不好控制的地方，首先从量的方面来说很难控制，再且CO
2的溶解度很低直接通入很难说有多少溶解在水中。我设计下图可以解决第二个问题。
定量控制二氧化碳的生成量，如果没有吸收则可以用最后的装置利用排水法测量二氧化碳的体积。就算最后每一个体积都不太一样，还是可以经过计算得到实验结果的。假如血浆吸收5ml的二氧化碳PH值的变化为0.1，而红细胞吸收的二氧化碳的量为6ml，PH值的变化为0.1，说明血细胞对二氧化碳的缓冲能力较强。
6.
试验总结：
实验室一个常规试验，没有理论上的创新，但是实验的设计都是由我自己一手设计的，其实还存在很多不完整的地方，有待完善。
