文章介绍了如何测定血浆和红细胞的缓冲能力的测定。根据血液中的缓冲对原理，在血浆中以碳酸氢盐缓冲对为主，在红细胞中以血红蛋白缓冲液为主，进入血液的固定酸（非挥发性酸），则主要由血浆中的缓冲对为主，而非挥发性酸则由红细胞的缓冲液为主。根据以上实验原理，最后实验数据证明：（1）血浆，红细胞都有一定的缓冲能力。（2）红细胞以对挥发性酸缓冲对为主。

关键词：血浆 红细胞缓冲能力测定

2.1 实验原理

血浆中的缓冲液：

NaHCO₃/H₂CO₃，Na₂HPO₄/NaH₂PO₄，Na-血浆蛋白/H-血浆蛋白

红细胞中的缓冲系统：

K-Hb/H-Hb K-HbO₂/H-HbO₂ K₂HPO₄/KH₂PO₄ KHCO₃/H₂CO₃

以上缓冲对中，在血浆中以碳酸氢盐缓冲对为主，在红细胞中以血红蛋白缓冲液为主，进入血液的固定酸（非挥发性酸），则主要由血浆中的缓冲对为主，而非挥发性酸则由红细胞的缓冲液为主。根据以上实验原理，我想设计以下实验证明：（1）血浆，红细胞都有一定的缓冲能力。（2）红细胞以对挥发性酸缓冲对为主。

2.2 实验药品及仪器

   肝素，离心机，乳酸（3%），离心管，碳酸，PH计，酸式滴定管，烧杯（50ml，8只），铁架台注射器（20ml）碳酸氢钠 盐酸

2.3 实验对象

   新鲜哺乳动物血液（可用别组的动物实验完成后采血）

2.4 实验步骤

2.4.1. 去8只50ml的小烧杯，编号1-8。

2.4.2. 取80ml新鲜血液加入肝素（125u/ml）防凝，平均分为4份，一份放入1号杯，一份放入2号杯，另两份放入两根离心管中。

2.4.3. 离心4000rpm,15min.将红细胞和血浆分开（虽然在该步中白细胞也会沉淀下来，但是就缓冲能力方面白细胞针对红细胞而言可以忽略不计，原因：在整体的缓冲能力中红细胞占18%。白细胞占3%。）

2.4.4. 将离心后的血浆部分放入3号，4号杯中，红细胞经生理盐水一次洗涤后放入5号。6号杯中，然后往3-8号杯中加入适量的生理盐水使1-8号杯中的物质总体积相等。

2.4.5. 按下表1加酸，并计录PH值的变化

3.1.以下是加入乳酸之前和加入以后的PH值变化的值
表2

 

 

3.2 下面是往溶液中通入等体积CO₂前和后全血、血浆、血细胞、生理盐水的PH值的变化

4.1 从表2的数据可得：

X全血（=0.06736） > X血浆（=0.06502）〈 X红细胞（=0.10273）〈 X生理盐水（=0.17391）

    从上式可知对固定酸而言血浆的缓冲能力比红细胞强

注：1、X为每个标本实验前后的pH值的变化值与实验前pH值的商，即每个标本实验前后的pH值变化率（以下X’一样）；

          2、理论上：X全血〈X血浆，而实际所得结果刚好相反，原因可能是仪器和操作产生的误差引起。

4.2               从表3的数据可得：

X’全血（=0.0013）〈 X’红细胞（=0.0079） < X’血浆（=0.0247） 〈 X’生理盐水（=0.1014）

从上式可知对挥发性酸而言红细胞的缓冲能力比血浆强。

 

4.3              由表2和表3数据对比可得：

｜X’红细胞—X’血浆｜（0.0168） 〈 ｜X红细胞—X血浆｜（0.03771）

注：｜X红细胞—X血浆｜代表同一组中红细胞pH值变化率和血浆pH值变化率之差的绝对值。

从上式可知血浆的缓冲能力比红细胞强。原因：虽然对固定酸而言血浆的缓冲能力比红细胞强；对挥发性酸而言红细胞的缓冲能力不血浆强，但是血浆和红细胞对固定酸和挥发性酸都有缓冲能力，从实验数据我们可以看到，由于血浆的缓冲能力比红细胞强才使得｜X’红细胞—X’血浆｜（0.0168） 〈 ｜X红细胞—X血浆｜（0.03771）

的成立。

我的实验设计还存在很大的问题，下面是我对我实验的改进：

（1）：我在开始的时候没有考虑到经过离心很多老化的红细胞就会破裂，这样就会造成红细胞量的减少，所以最好是放入4度冰箱中静止，让其自然沉淀。

（2）.对于CO₂来说有很多不好控制的地方，首先从量的方面来说很难控制，再且CO₂的溶解度很低直接通入很难说有多少溶解在水中。我设计下图可以解决第二个问题。

定量控制二氧化碳的生成量，如果没有吸收则可以用最后的装置利用排水法测量二氧化碳的体积。就算最后每一个体积都不太一样，还是可以经过计算得到实验结果的。假如血浆吸收5ml的二氧化碳PH值的变化为0.1，而红细胞吸收的二氧化碳的量为6ml，PH值的变化为0.1，说明血细胞对二氧化碳的缓冲能力较强。