摘要
本实验采用常规离体灌注小肠平滑肌标本活动的实验方法,记录用药前后肠段平滑肌自发收缩性活动变化。用不同浓度乙醇(5%、10%、15%、17.5%)对小肠平滑肌自发收缩活动进行作用,然后用其变化值与用药前比较差异有显著性，结果显示乙醇对小肠平滑肌活动有抑制性趋势，而且当乙醇浓度为17.5%时，收缩曲线几乎为一直线（且该直线在正常曲线基线的上方）
[关键词] 乙醇;小肠平滑肌;收缩活动
1 前言
1.1 乙醇对离体小肠平滑肌影响的研究现状
据报道乙醇可抑制心肌自律性和降低心肌收缩力;大量饮酒可导致心血管疾病,如血压改变、心绞痛、心肌病、脑卒中等。消化道是乙醇进入体内最先受刺激的部位,有报道,乙醇进入胃内可造成胃粘膜损伤,但乙醇对小肠活动有何影响,目前还不十分清楚。有研究报道,乙醇对心肌细胞钠离子跨膜内流有一定抑制用,对心肌细胞内贮存的钙离子释放有显著抑制作用。因认为乙醇对心肌细胞收缩的抑制作用可能是通过改变肌水平或肌浆对钙离子的转运而实现的[1],但不影响细胞外跨膜内流[6]。乙醇对小肠平滑肌的抑制作用可能与乙醇抑制钠离子、钙离子转运有关。
1.2 本实验的目的和结论
本实验以家兔离体十二指肠为标本,观察不同浓度乙醇对离体小肠平滑肌活动的影响,进一步了解乙醇与人体健康的关系。其中当乙醇浓度为17.5%时离体小肠平滑肌的活动就被完全抑制。
本次实验结果和张光主等[4]的结果刚好相反。原因尚待查明。
2 材料与方法：
[实验动物]:
健康家兔体重1. 5～2ｋｇ,雌性
2.2 [仪器与药品]
计算机生物信号采集处理系统;CW-1型平滑肌槽恒温仪,;无水乙醇(20℃时密度为0 789ｇ/ｍ1);Tyrodes溶液,临用时配制。
2.3 [实验方法]
2.3.1 在实验前禁食24ｈ,自由饮水,实验前1ｈ喂食。将家兔处死后，立即放入兔台上迅速沿腹正中线切开腹部,找出胃幽门与十二指肠交界处,以此处为起点,取十二指肠近端20ｃｍ肠管。先将该肠管相连的肠系膜分离,再将拟取的肠管两端剪断,将游离的肠管取出体外,置于盛有保持38℃的Ｔｙｒｏｄ ｓ溶液的烧怀中,用注射器抽取温Ｔｙｒｏｄｅ ｓ溶液洗净肠内容物。当肠管活动明显时,将其剪成2cm左右的肠段作为实验标本。
2.3.2 一组为正常组，二组将肠管翻过来内壁朝外
2.3.3 结扎,并将一端固定于通气管钩上,置于盛有30ml Tyrodes溶液的浴管中;另一端经细线连于张力换能器上,然后通过升降换能器的高度,以牵张结线,使标本垂直悬挂于恒温的Tyrodes溶液的浴管中。给予2ｇ负荷平衡组织30min,将充满空气的气囊经一胶管与通气管相接,通入浴管的Tyrodes溶液中,持续缓慢放气,其速度以持续单个气泡出现而不冲动小肠为宜。小肠平滑肌活动变化值的测量采用计算机生物信号采集处理系统。
2.3.4 向标本中滴入不同浓度乙醇(5%、10%、15%、17.5%)，并记录其收缩曲线。
[注意]
待标本出现规律的自发节律性收缩并稳定20min后开始记录。先记录一段肠管在Tyrodes溶液恒温38℃时的收缩曲线,观察肠管的收缩幅度、收缩频率,并从收缩曲线的基线改变,观察小肠平滑肌张力变化,以收缩基线上升表示张力增强,收缩基线下降表示肌张力减弱。每次实验项目完成后,用38℃温热Tyrodes溶液反复冲洗肠管,每次5min,共3次,然后观察肠管活动恢复情况。
3 结果
3.1 正常组的正常情况下的小肠自动节律性收缩
3.2 离体小肠在5%的乙醇刺激下的曲线
3.3 离体小肠在10%乙醇刺激下的曲线
3.4 离体小肠在15%乙醇刺激下的曲线
3.5 离体小肠在17.5%乙醇刺激下的曲线
以上5张图都是一组正常组的图形，二组(将肠管翻过来内壁朝外)由于操作等问题未能做出来。
4 分析与讨论
4.1 分析
平滑肌收缩活动中，肌球蛋白轻链激酶(MLCK)对肌球蛋白轻链(MLC20)的钙依赖性磷酸化是引起平滑肌收缩的主要原因。在内脏平滑肌中肌浆网不发达，所以它的收缩主要依赖细胞外钙离子。
从3.2—3.5可以看到当加入乙醇后小肠收缩曲线的基线升高（而且升高后的基线四幅图都差不多）、频率变缓、幅度变小，但波峰高度几乎保持一致，从这四幅图可以明显看到乙醇对小肠平滑肌的活动有抑制作用，并且使曲线停止于收缩状态。当乙醇浓度为17.5%时基本上抑制了小肠平滑肌的活动。
4.2 猜测
猜测1：在钙离子流向肌浆而引起收缩过程中，膜电位逐渐升高，当膜电位达到一定值（以后用V表示）钙离子通道开始关闭，也就是说钙离子通道是一种电压门控通道，而乙醇可以和关闭的钙离子通道可逆性结合，从而维持后者的关闭状态。
因此 ：1. 收缩曲线的基线上升且几乎一致（这时的膜电位就是上述的V）
2. 乙醇浓度的升高被乙醇维持的关闭着的钙离子通道增多，波形越来越缓直至变成一直线。
3. 由于是可逆性结合故而经台氏液洗涤后仍能恢复。
猜测2：乙醇可能影响钙泵的功能，因为舒张过程是由肌浆的钙离子下降引起，而钙离子的下降主要为钙泵的功劳。乙醇和钙泵可逆性结合来抑制钙泵的作用，从而使曲线停止于收缩状态
5 结论
含酒精的饮料对小肠有较大的影响，它能使小肠活动停止于收缩状态从而对机体造成伤害，所以我们在日常生活中应该少喝含酒精的饮料。
参考文献
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[6]Figuredo VM,chang KC, bader AJ et al.Chronic alcohol induced changes inj cardiac contractility are not due to changes in the cytosolic CA2+ TRANSIENT. Am J physiol 1998,275(1):H122.
